發(fā)布時(shí)間： 2021-07-13 點(diǎn)擊次數(shù)： 1290次
對(duì)于
ATCC細(xì)胞的初代培養(yǎng)或原代培養(yǎng)，是從供體獲取組織后的第1次培養(yǎng)。其主要的優(yōu)點(diǎn)是組織和細(xì)胞剛剛離體，生物性狀尚未發(fā)生很大的變化，具有二倍體遺傳性狀，在供體來源充分、生物條件穩(wěn)定的情況下（年齡、性別），在一定程度上能反映體內(nèi)狀態(tài)。
ATCC細(xì)胞進(jìn)行初代培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)步驟如下：
1.剪切
把組織小塊（1cm³）置入小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸凈Hanks液，用眼科剪反復(fù)剪切成1mm³塊為止。
2.擺布
用彎頭吸管吸取若干小塊，置入培養(yǎng)瓶中；用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養(yǎng)瓶底上，小塊相互距離以0.5cm為宜，每一25ml培養(yǎng)瓶底可擺布20-30塊。
3.輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，令瓶底向上。注意翻瓶時(shí)勿令組織小塊流動(dòng)，塞好瓶塞，置36.5℃溫箱2小時(shí)左右（勿超過4小時(shí)），使小塊微干涸。
4.培養(yǎng)
取出培養(yǎng)瓶并開塞，保持46°斜持培養(yǎng)瓶（瓶底仍向上），向瓶底角部輕輕注入培養(yǎng)液小許，然后緩緩再把培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)過來，讓培養(yǎng)液慢慢覆蓋附于瓶底上的ATCC細(xì)胞組織小塊（組織小塊附著尚不牢，注意不要把組織塊沖走）；置溫箱中靜止培養(yǎng)。待細(xì)胞從組織塊游出數(shù)量增多后，再補(bǔ)加培養(yǎng)液。
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